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■ 원리
 
크로마토그래피는 혼합물이 이동상(mobile phase)의 영향하에서 정지상(stationary phase)을 통과할 때 일련의 속도차이에 의한 결과로 혼합물을 분리시키는 방법으로서 기본적인 크로마토그래피의 진행과정은 두상(이동상, 정지상) 사이에서 시료분자들의 분배로 구성된다. 시료분자들이 이동상으로 존재하는 동안은 컬럼 아래로 이동하며, 정지상과 결합하면 이동하지 못한다.  따라서 시료가 두가지 이상의 분자들로 구성되었다면 서로 다른 정도의 분포가 상사이에 생기게 되어 분리된다. HPLC는 solvent, pump, injector, column, detector, recorder로 구성된다. 분석하고자 하는 대상물질의 특성(분자량, 이온성, 용해도 등)에 따라 컬럼을 선택한 다음, 적합한 이동상을 사용하여 시료를 분리한다. 분리된 시료는 시료에 대한 높은 감도, 선택성을 가지며, 적당한 밴드폭, 낮은 검출한계 등을 가지는 검출기를 선택하여 분석한다. 여러 가지 검출기 중 자외선/가시선(UV/VIS) 검출기는 광원에서 특정 파장의 빛이 광이나 장치를 거쳐 Cell내의 시료에 투사되면 일부는 흡수되고 일부는 시료를 통과하게 되는데, 특정한 시료는 특정파장의 빛에 대한 흡광도가 높아서 시료를 투과하는 빛의 강도는 상대적으로 작아지게 된다. 이때 흡수되는 빛의 양은 용액내의 흡광시료의 농도, 빛의 파장과 빛의 시료를 통과하는 거리 등과 관계가 있다.

■ 특징

기체 크로마토그래피는 휘발성인 화합물을 분리분석하는데 그 신속성과 감도 때문에 널리 사용되어 왔다. 그러나 천연물, 생체성분, 합성물질 등의 화학물질의 약 80∼85%는 휘발성이 낮고, 기체 상으로 처리하기보다는 용액으로 취급하는 것이 더 편리하기 때문에 이들 물질은 액체 크로마토그래피의 대상이 된다. 즉, 적당한 용매에 녹일 수 있는 물질이라면 그것의 휘발성, 열에 대한 안정성, 무기화합물 또는 유기화합물 및 분자량에 관계없이 액체 크로마토그래피에 의해 분리분석이 가능하다. 
액체 크로마토그래피에서 컬럼에 압력을 가하여 고속으로 용리시킬 뿐만 아니라 관 충전제의 입자크기가 수 ㎛되고 분리성능이 우수한 분리관을 개발하여 사용함으로써 관효율을 크게 향상시킨 액체 크로마토그래피를 고성능 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)라고 한다. HPLC는 높은 감도를 가지며 쉽고 정확하게 분석할 수 있고, 비휘발성 성분이나 열적으로 불안정한 물질을 빠르게 분석할 수 있기 때문에 모든 분리분석 중에서 가장 널리 응용된다.

■ 규격

· Model : HPLC(Aglient 1260 series)
· Quaternary Gradient  pump
· Detector : DAD, FLD, ELSD

■ 응용분야

· 분석가능한 시료는 이동상으로 사용하는 용매에 녹으며 분자량이 2000이하인 물질
· 비휘발성 즉, 이온성 화합물, 염료, 거대분자와 온도에 민감한 화합물의 분석
  - 각종 비타민류, 탄수화물류, 핵산류, 지방성분, 색소, 제초제, 혈중에 존재
  하는 약물, 터펜류, 스테로이드, 무기물, 금속-유기물 등의 정성 및 정량 · UV 유도체의 정성 및 정량
· 시료중에 포함된 미지물질의 purity test